Kit di reagenti di aspartato aminotransferasi GOT-11 series

in soluzioneper chimica clinicadi latticodeidrogenasi

Per la determinazione quantitativa dell'aspartato aminotransferasi (AST) nel siero umano. METODOLOGIA Nel 1955 Karmen ha sviluppato una procedura di dosaggio cinetico basata sull'uso di malato deidrogenasi e NADH. Procedure ottimizzate sono state presentate da Henry nel 1960 e da Amador e Wacker nel 1962. Queste modifiche aumentarono l'accuratezza e ridussero l'effetto delle sostanze interferenti. Nel 1978 l'IFCC ha pubblicato un metodo raccomandato che includeva il P-5-P. Il presente metodo si basa sulle raccomandazioni dell'IFCC, ma non contiene P-5-P poiché la maggior parte dei campioni contiene quantità adeguate di questo cofattore per un recupero completo dell'attività delle AST. Principio L'aspartato aminotransferasi (AST) catalizza il trasferimento del gruppo amminico dal laspartato all'α-chetoglutarato per produrre ossalacetato e L-glutammato. L'ossalacetato subisce una riduzione con contemporanea ossidazione del NADH a NAD nella reazione indicatore catalizzata dalla malato deidrogenasi (MDH). Il tasso di diminuzione dell'assorbanza a 340 nm è direttamente proporzionale all'attività dell'AST. La lattato deidrogenasi (LDH) viene aggiunta per prevenire l'interferenza del piruvato endogeno, normalmente presente nel siero. PREPARAZIONE DEI REAGENTI Preparare il reagente di lavoro mescolando 4 parti di reagente R1 con 1 parte di reagente R2 (ad es. 200 µL di R1 con 50 µL di R2) DETERIORAMENTO DEL REAGENTE Non utilizzare il reagente se: 1. L'assorbanza iniziale a 340 nm è inferiore a 1,0. 2. Il reagente non soddisfa i parametri di prestazione dichiarati. MATERIALI RICHIESTI MA NON FORNITI 1. Dispositivi di pipettaggio accurati. 2. Provette/supporti. 3. Timer. 4. Spettrofotometro in grado di leggere a 340 nm. (UV) 5. Bagno di riscaldamento/blocco (37°C).