Per la determinazione quantitativa della transferrina nel siero umano.
Principio :
Gli anticorpi anti-transferrina, miscelati con campioni contenenti transferrina, formano complessi insolubili. Questi complessi causano una variazione dell'assorbanza, dipendente dalla concentrazione di transferrina del campione del paziente, che può essere quantificata per confronto con un calibratore a concentrazione nota di transferrina.
REAGENTI
R1 (DILUENTE): Tampone Tris 20 mmol/L, PEG 8000, pH 8,3
R2 (ANTIBODY): Siero di capra, antiumano che si trasferisce a pH 7,5. Sodio azide 0,95 g/L
CALIBRAZIONE (facoltativa) Si consiglia di utilizzare un calibratore di proteine del siero.
PREPARAZIONE DEI REAGENTI
I reagenti sono pronti all'uso.
PROCEDURA
Lunghezza d'onda: 340 nm (320-360 nm)
Temperatura di lavoro: 37°C
Percorso ottico: 1 cm
Tipo di analisi : Turbidimetria
Direzione : Aumento
1. Portare i reagenti e il fotometro (portaprovette) a 37°C.
2. Regolare lo strumento a zero con acqua distillata.
3. Pipettare in una provetta
4. Mescolare e leggere l'assorbanza (Abs.1) dopo l'aggiunta del campione o del calibratore.
5. Pipettare in una provetta
6. Mescolare bene e leggere l'assorbanza (Abs.2) dei calibratori e del campione esattamente 2 minuti dopo l'aggiunta di R2.
CALCOLO
Calcolare la differenza di assorbanza (Abs.2-Abs.1) di ciascun punto della curva di calibrazione e tracciare un grafico dei valori ottenuti rispetto alla concentrazione di transferrina di ciascuna diluizione del calibratore. La concentrazione di transferrina nel campione viene calcolata per interpolazione del suo (Abs.2Abs.1) nella curva di calibrazione.
CONTROLLO DI QUALITÀ
Il controllo delle proteine del siero è consigliato per monitorare le prestazioni delle procedure di analisi manuali e automatizzate.
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