Per la determinazione quantitativa in vitro del fosforo inorganico nel siero.
METODOLOGIA
La misurazione del fosforo inorganico nel siero viene solitamente effettuata formando un complesso di fosfomolibdato e riducendolo a sua volta a un complesso di colore blu molibdeno. I metodi differiscono per quanto riguarda la scelta degli agenti riducenti: cloruro stannoso, fenilidrazina, acido aminonaftolsolfonico, acido ascorbico, pmetilaminofenolsolfato, N-fenil-p-fenilendiammina e solfato ferroso. Questi metodi soffrivano di instabilità del colore, fasi di deproteinizzazione e complessità di esecuzione. L'aggiunta di un tensioattivo ha eliminato la necessità di preparare un filtrato privo di proteine, ha accelerato la produzione del colore, lo ha stabilizzato e ha semplificato la procedura. Molti dei componenti di questi reagenti erano instabili e dovevano essere conservati separatamente. La misurazione quantitativa dei complessi fosfomolibdati non ridotti è stata riportata per la prima volta da Simonsen nel 1946. Daly ed Ertingshausen hanno adattato questa tecnica per la determinazione del fosforo inorganico nel 1972. Amador e Urban hanno ulteriormente modificato questa procedura nello stesso anno. Il presente metodo è una modifica della procedura sopra descritta che utilizza un singolo reagente stabile che agisce nell'intervallo UV.
Principio
Fosforo inorganico + H2S04 + Molibdato di ammonio Complesso fosfomolibdato non ridotto.
Il fosforo inorganico reagisce con il molibdato di ammonio in ambiente acido per formare un complesso fosfomolibdato che assorbe la luce a 340 nm. L'assorbanza a questa lunghezza d'onda è direttamente proporzionale alla quantità di fosforo inorganico presente nel campione.
Precauzioni
1. Questo reagente è solo per uso diagnostico in vitro.
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