Kit di reagenti dell'alanina aminotrasnferasi GPT – 11 series

in soluzionediagnosticoper chimica clinica

Per la determinazione quantitativa dell'alanina aminotransferasi nel siero. METODOLOGIA La Federazione Internazionale di Chimica Clinica (IFCC) ha pubblicato nel 1980 una proposta di metodo raccomandato che utilizza il dosaggio accoppiato LDH-NADH. La procedura qui descritta si basa su tale metodo. Principio L'ALT catalizza il trasferimento del gruppo amminico dalla L-alanina al -chetoglutarato con conseguente formazione di piruvato e L-glutammato. La lattato deidrogenasi catalizza la riduzione del piruvato e la contemporanea ossidazione del NADH a NAD. Il tasso di diminuzione dell'assorbanza risultante è direttamente proporzionale all'attività dell'ALT. PREPARAZIONE DEI REAGENTI Preparare il reagente di lavoro mescolando 4 parti di reagente R1 con 1 parte di reagente R2. (ad es. 200 µL di R1 con 50 µL di R2) DETERIORAMENTO DEL REAGENTE Non utilizzare il reagente se: 1. L'assorbanza iniziale a 340nm è inferiore a 0,8. 2. Il reagente non soddisfa i parametri di prestazione dichiarati. PRECAUZIONI 1. Questo set di reagenti è destinato esclusivamente all'uso diagnostico in vitro. 2. Il reagente R1 contiene sodio azide come conservante. Non ingerire. RACCOLTA E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI 1. Si raccomanda il siero non emolizzato. I globuli rossi contengono ALT che possono dare risultati falsamente elevati. 2. L'ALT nel siero è stabile per tre giorni a temperatura ambiente (15-30°C), 1 settimana a 4°C. PROCEDURA Lunghezza d'onda: 340 nm Tipo di test: cinetico Direzione di reazione : Decrescente Temperatura : 37°C Percorso ottico : 1 cm 1. Portare a temperatura ambiente ( 15 -30 °C) 2. Portare il fotometro a 0 (zero) con acqua distillata 3. Miscelare e incubare a 37 °C 4. Dopo 60 sec. leggere e registrare l'assorbanza 5. Riportare la provetta a 37 °C.