Questo reagente è destinato alla determinazione quantitativa in vitro della bilirubina totale nel siero umano.
METODOLOGIA
Il metodo della bilirubina totale si basa su una modifica del metodo di Pearlmen e Lee che prevede l'uso di un tensioattivo come solubilizzante. Il nitrito di sodio viene aggiunto all'acido solfanilico per formare acido solfanilico diazotizzato. La bilirubina presente nel campione reagisce con l'acido solfanilico diazotato per produrre azobilirubina che assorbe fortemente a 550 nm. L'assorbanza misurata a 550 nm è direttamente proporzionale alla concentrazione totale di bilirubina nel campione.
REAGENTE
PREPARAZIONE Tutti i reagenti sono pronti all'uso.
DETERIORAMENTO DEI REAGENTI
Non utilizzare il reagente se:
1. Presenza di particelle e torbidità.
2. Sviluppo del colore in R2.
NTERFERENZA
Un elenco completo di farmaci e sostanze che possono interferire con il test della bilirubina totale. Emoglobina: nessuna interferenza fino a 500 mg/dL. Lipemia: Nessuna interferenza in presenza di trigliceridi fino a 1500 mg/dL. L'acido ascorbico è un'interferenza.
ATTREZZATURA AGGIUNTIVA NECESSARIA MA NON FORNITA
1. Spettrofotometro o colorimetro che misura l'assorbanza a 555 ( 530-580) nm.
2. Acqua deionizzata e relativa attrezzatura, ad esempio: pipette
3. Materiali di consumo specifici per l'analizzatore, ad esempio: tazze per campioni
4. Materiali di controllo e calibratori.
Note sulla procedura
Per la determinazione della bilirubina nei neonati, pipettare 10 µL di campione. Moltiplicare il risultato per 2.
CALIBRAZIONE
è possibile utilizzare il calibratore del siero o il calibratore della bilirubina dei prodotti bt.
CONTROLLO DI QUALITÀ
L'integrità della reazione deve essere monitorata utilizzando un controllo a due livelli con valori noti di bilirubina totale.
---