Per la determinazione quantitativa dell'UREA nel siero. Solo per uso diagnostico in vitro.
Metodologia
Talke e Schubert hanno introdotto nel 1965 una procedura totalmente enzimatica che utilizza l'ureasi e la glutammato deidrogenasi. La presente procedura si basa su una modifica del loro metodo.
Preparazione dei reagenti
Preparare il reagente di lavoro mescolando 4 parti di reagente 1 con 1 parte di reagente 2 (ad es. 200 µL di R1 con 50 µL di R2)
Deterioramento del reagente
Il reagente non deve essere utilizzato se il reagente di lavoro presenta un'assorbanza del bianco del reagente inferiore a 1,0 a 340 nm.
Precauzioni
1. Questo reagente è solo per uso diagnostico in vitro.
2. Evitare di ingerire il reagente poiché la tossicità non è ancora stata determinata.
3. I reagenti contengono sodio azide (0,2%) come conservante
Raccolta e conservazione dei campioni
1. Si raccomanda il siero.
2. Non utilizzare plasma contenente anticoagulanti.
3. Tutto il materiale a contatto con il campione deve essere privo di ammoniaca e metalli pesanti. 5. Tutti i campioni di sangue devono essere considerati potenzialmente infettivi.
Materiale richiesto ma non fornito
1. Dispositivi di pipettaggio accurati. (10ul e 1,0ml)
2. Timer. (In grado di misurare intervalli di 30 e 60 secondi)
3. Provette
4. Spettrofotometro con cuvetta a temperatura controllata in grado di misurare a 340 nm
PROCEDURA
Lunghezza d'onda: 340 nm
Temperatura: 37°C
Percorso ottico: 1 cm
Tipo di test : Tempo fisso
Direzione di reazione : Decrescente
1. Portare a temperatura ambiente (15 -30 °C)
2. Portare il fotometro a 0 (zero) con acqua distillata.
Limitazioni
I campioni con valori superiori a 250 mg/dL devono essere diluiti con soluzione fisiologica allo 0,9% 1:1, sottoposti a nuovo dosaggio e i risultati moltiplicati per due.
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