Kit di test della tubercolosi cobas® MTB-RIF/INH

diagnosticodel Mycobacterium tuberculosisdella Chlamydia trachomatis

Panoramica
cobas® MTB-RIF/INH per l'uso sui sistemi cobas® 5800/6800/8800 è un test diagnostico in vitro qualitativo automatizzato che utilizza PCR in tempo reale per il rilevamento diretto di mutazioni associate alla resistenza alla rifampicina nel gene rpoB e mutazioni associate alla resistenza all'isoniazide nei geni katG e inhA di Mycobacterium tuberculosis da campioni respiratori umani. Il test è previsto come test riflesso insieme a cobas® MTB e, in combinazione con coltura e test di sensibilità, come ausilio nella diagnosi di M. tuberculosis multiresistente (MDR-TB).

Uso previsto
Per l'analisi di espettorato grezzo, ed espettorato digerito/disinfettato (N-acetil-L-cisteina/NaOH) e campioni di lavaggio broncoalveolare (BAL) risultati positivi per MTBC con cobas® MTB.

Principio / Metodo
La liquefazione e l'inattivazione delle micobatteri avvengono con cobas® Microbial Inactivation Solution (MIS), seguite da sonicazione. I sistemi cobas® 5800/6800/8800 eseguono la preparazione automatizzata del campione (estrazione e purificazione degli acidi nucleici), l'amplificazione PCR in tempo reale, la rilevazione e l'assegnazione automatica dei risultati (positivo, negativo, non valido).

Preparazione ed estrazione del campione
Il rilascio degli acidi nucleici avviene tramite disgregazione chimica (MIS, cobas® omni Lysis Reagent), enzimatica (proteinasi) e fisica (sonicazione). Gli acidi nucleici rilasciati si legano alla superficie di silice delle particelle di vetro magnetiche; impurità e inibitori della PCR vengono rimossi tramite lavaggi e gli acidi nucleici purificati vengono eluiti a temperatura elevata.

PCR e rilevazione
Si utilizzano primer specifici per gli obiettivi. Sonde specifiche per le mutazioni, marcate con fluorofori, consentono la rilevazione simultanea del complesso MTB, delle mutazioni di resistenza alla rifampicina e all'isoniazide in cinque canali di rilevazione (le mutazioni di rifampicina sono rilevate in tre canali). Il master mix contiene dUTP (al posto di dTTP) e AmpErase (uracil‑DNA glycosylase) per controllare la contaminazione per trasferimento. La rilevazione in tempo reale misura la fluorescenza dei reporter durante la PCR.

Target rilevati

• Complesso MTB (bersaglio genomico a copia singola)
• Mutazioni associate a resistenza alla rifampicina (gene rpoB) — 18 mutazioni rilevate
• Mutazioni associate a resistenza all'isoniazide (gene katG e regione promotrice inhA) — 7 mutazioni rilevate

Strumenti previsti / flusso di lavoro
Destinato all'uso su cobas® 5800, cobas® 6800 e cobas® 8800. I sistemi offrono gestione automatizzata dei campioni, estrazione degli acidi nucleici, amplificazione PCR, rilevazione e reportistica automatica dei risultati.

Informazioni per l'ordine
Numero materiale | Descrizione materiale
09040617190 | KIT COBAS 58/68/8800 MTB-RIF/INH 192T

Avvertenza normativa
Per uso diagnostico in vitro.