PanoramicaI Kit per quantificazione di librerie KAPA offrono una soluzione completa per la quantificazione basata su qPCR di librerie per sequenziamento di nuova generazione (NGS), garantendo accuratezza, affidabilità e riproducibilità. I kit comprendono KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (formulato con diversi coloranti di riferimento passivi a seconda dello strumento qPCR), un premix di primer per quantificazione specifico per la piattaforma di sequenziamento e un set di standard di DNA pre-diluiti.
Contenuto- KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) — disponibile in formulazioni universali e specifiche per strumento (ROX High, ROX Low o colorante specifico dello strumento)
- Premix di primer 10X per quantificazione delle librerie (specifico per la piattaforma)
- Set di standard di DNA pre-diluiti (Illumina DNA Standards 1–6)
Vantaggi in breve- Reagenti completi per la quantificazione assoluta basata su qPCR di librerie NGS singole o pool indicizzati
- Curve standard che supportano diversi workflow di costruzione delle librerie, incluse le metodologie senza PCR
- La quantificazione misura solo i frammenti idonei al sequenziamento
- Standard pre-diluiti con elevata consistenza lotto su lotto per semplificare il workflow e migliorare la riproducibilità
- Modelli di analisi dati e supporto al sequenziamento disponibili per agevolare le run
Prestazioni e affidabilitàLa DNA polimerasi KAPA SYBR FAST è formulata per amplificare frammenti di DNA diversi con efficienze comparabili, consentendo una quantificazione accurata su popolazioni di librerie eterogenee. I dati di validazione mostrano efficienze di amplificazione consistenti tra diversi ampliconi e lotti, supportando densità di cluster riproducibili e risultati di sequenziamento coerenti.
Applicazioni principali- Whole Genome Sequencing (WGS)
- Whole Exome Sequencing (WES)
- Sequenziamento mirato (panel personalizzati)
- RNA-Seq
- ChIP-Seq
- Sequenziamento di ampliconi
- Methyl-Seq
Varianti di kit disponibili e prodotti correlati- Lib Quant Kit (ABI) — kit completo (500 reazioni)
- Lib Quant Kit (Uni) — kit completo (universale; 500 reazioni)
- Lib Quant Kit (BioRad) — kit completo (500 reazioni)
- Lib Quant Kit (ROX Low) — kit completo (500 reazioni)
- Lib Quant Kit (LC480) — kit completo (500 reazioni)
- LQ Stds 0 - 6 — set di standard di DNA (140 reazioni)
- LQ Stds — set di standard di DNA (120 reazioni)
- LQ Control Standard — standard di controllo (20 reazioni)
- LQ Primer + KSF (Uni) — primer + KAPA SYBR FAST (500 reazioni)
- LQ Primer + KSF (LC480) — primer + KAPA SYBR FAST (500 reazioni)
Note sull'impatto sul workflowLa quantificazione basata su qPCR misura i frammenti idonei al sequenziamento, permettendo densità di cluster prevedibili, pool equimolari efficaci per il sequenziamento multiplex e una minore necessità di titolazione delle lane. I kit sono formulati per fornire risultati coerenti anche con campioni di qualità variabile, ad esempio DNA derivato da FFPE.
Caratteristiche / specifiche tecniche- Piattaforma compatibile: ecosistema Illumina
- Tipo di libreria: qualsiasi libreria NGS
- Materiale di partenza: qualsiasi libreria NGS pronta per l'amplificazione dei cluster
- Intervallo di concentrazione della curva standard: 20–0,0002 pM (librerie Illumina)
- Applicazioni di sequenziamento: WGS, WES, sequenziamento mirato, RNA-Seq, ChIP-Seq, sequenziamento di ampliconi, Methyl-Seq
- Temperatura di conservazione: conservare a -15°C a -25°C