Le fosfatasi alcaline (ALP) catalizzano l'idrolisi del 4-nitrofenilfosfato (4-NPP) con formazione di 4-nitrofenolo libero e fosfato inorganico, agendo sul tampone alcalino come accettore del gruppo fosfato.
La reazione è monitorata cineticamente a 405 nm dalla velocità di formazione del 4-nitrofenolo, proporzionale all'attività dell'ALP presente nel campione.
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