L'urea viene idrolizzata dall'ureasi in ammoniaca e anidride carbonica. L'ammoniaca generata reagisce con ipoclorito alcalino e salicilato di sodio in presenza di nitroprussiato di sodio come agente accoppiante per produrre un cromoforo verde. L'intensità del colore formato è proporzionale alla concentrazione di urea nel campione.
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