La colinesterasi (CHE) catalizza l'idrolisi del substrato butirriltiocolina, formando butirrato e tiocolina. Quest'ultima riduce l'acido 5,5'-mercaptobis-2-nitrobenzoico (DMNB) a 5-mercapto-2-nitrobenzoato (5-MNBA), un composto colorato. La reazione viene monitorata cineticamente a 405 nm in base alla velocità di formazione del colore giallo, proporzionale all'attività CHE nel campione.
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