"Molgen Genetics Haemostatic Disease (B-Fibrinogen/FXIII) Kit" è un kit di analisi per la rilevazione del polimorfismo a singolo nucleotide nei geni FGB e F13A1 del sistema di coagulazione del sangue mediante PCR in tempo reale con rilevamento delle curve di fusione.
Introduzione
"Molgen Genetics Haemostatic Disease (B-Fibrinogen/FXIII) Kit" è destinato alla rilevazione del polimorfismo a singolo nucleotide G (-455)A nel gene FGB (codifica il fibrinogeno e il fattore I della coagulazione) e G103T nel gene F13A1 (codifica la subunità A del fattore XIII della coagulazione) in campioni clinici (sangue intero, epitelio buccale) utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi (PCR) in tempo reale con analisi della curva di melting.
I risultati della genotipizzazione sono presi in considerazione nella complessa valutazione del rischio di trombofilia (suscettibilità alla trombofilia ereditaria).
L'estrazione del DNA da campioni clinici può essere eseguita con il "Molgen Universal Extraction Kit".
Il kit è destinato all'uso con il ciclatore PCR a blocco CFX96 (Bio-Rad, USA) come Adaltis AmpliLab.
Il kit contiene i reagenti necessari per 48 test, compresi i campioni di controllo.
Principio del metodo
Il principio del metodo si basa sull'amplificazione della regione di DNA umano selezionata con la successiva formazione di duplex ibridi del prodotto PCR con la sonda DNA specifica e la rilevazione delle curve di fusione dei duplex.
La fase di amplificazione consiste in cicli ripetuti: denaturazione a temperatura del modello di DNA, annealing dei primer su siti specifici del modello di DNA ed estensione dei primer con la Taq polimerasi.
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