Il kit di reagenti MOLgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5) è destinato alla determinazione differenziale dei polimorfismi a singolo nucleotide del sistema di coagulazione e del ciclo dei folati mediante PCR in tempo reale con rilevamento delle curve di fusione. I kit contengono solo reagenti per la PCR in tempo reale.
Introduzione
"Molgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5) Kit" è destinato alla determinazione differenziale dei polimorfismi 20210 G/A del gene F2 (fattore di coagulazione II, protrombina) e 1691 G/A (mutazione Leiden) del gene F5 (fattore di coagulazione V, proaccelerina) mediante reazione a catena della polimerasi (PCR) in tempo reale seguita dalla fusione dei prodotti di ibridazione con un tag fluorescente e dal rilevamento delle curve di fusione.
Il kit è destinato all'uso con il ciclatore PCR a blocco CFX96 (Bio-Rad, USA) come Adaltis AmpliLab.
Il kit di analisi può essere applicato nella pratica clinica per uno studio completo dei fattori genetici che aumentano il rischio di disturbi del sistema di coagulazione del sangue.
L'estrazione del DNA umano da campioni clinici (epitelio buccale, sangue intero) viene eseguita con il kit "MOLgen Universal Extraction Kit".
Il kit è progettato per l'analisi di 48 campioni, compresi quelli di controllo.
Principio del metodo
Il principio del metodo si basa sull'amplificazione della regione di DNA umano selezionata, seguita dalla rilevazione delle curve di fusione dei complessi ibridi nei prodotti della PCR e nelle sonde specifiche. Il processo di amplificazione consiste in cicli ripetuti: denaturazione termica della matrice di DNA, annealing di primer con sequenze complementari della matrice di DNA e sintesi di una catena complementare da questi primer con la Taq polimerasi.
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