Kit di reagenti in soluzione MOLgen

per PCR real-timeclinicoSNP

Il kit di reagenti è stato progettato per la determinazione del polimorfismo a singolo nucleotide del gene MCM6 - 13910C/T mediante PCR in tempo reale con rilevamento delle curve di fusione. I kit contengono solo reagenti per la PCR in tempo reale. Introduzione "MOLgen Genetics MCM6 Kit" è destinato alla determinazione del polimorfismo a singolo nucleotide -13910 C/T nel gene MCM6 (sito regolatore del gene LCT, che codifica la lattasi) in campioni clinici (sangue intero, epitelio buccale) utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi (PCR) in tempo reale con analisi della curva di melting. L'estrazione del DNA da campioni clinici può essere eseguita utilizzando il "MOLgen Universal Extraction Kit" prodotto da Adaltis S.r.l. I risultati dell'analisi PCR sono presi in considerazione nella diagnostica complessa delle malattie. Il kit è destinato all'uso con ciclatori PCR a blocco: AMPLIlab (Adaltis), CFX96 (Bio-Rad, USA). Il kit contiene i reagenti necessari per 48 test, compresi i campioni di controllo. Principio del metodo Il principio del metodo si basa sull'amplificazione della regione di DNA umano selezionata con la successiva formazione di duplex ibridi del prodotto PCR con la sonda DNA specifica e la rilevazione delle curve di fusione dei duplex. La fase di amplificazione consiste in cicli ripetuti: denaturazione a temperatura del modello di DNA, annealing dei primer su siti specifici del modello di DNA ed estensione dei primer con la Taq polimerasi. Dopo la fase di amplificazione, la temperatura viene abbassata e la sonda di DNA specifica marcata con fluorescenza si ibrida con l'amplicone marcato con il quencher, con conseguente diminuzione del segnale fluorescente. Durante la fase di fusione, la sonda di DNA viene rilasciata e la fluorescenza aumenta.