"MOLgen DNA Ureaplasma urealyticum S1 Kit" è un kit di analisi per la rilevazione del DNA di Ureaplasma urealyticum con il metodo della PCR in tempo reale.
Introduzione
"MOLgen DNA Ureaplasma urealyticum S1 Kit" è destinato alla rilevazione del DNA di Ureaplasma urealyticum, estratto da campioni clinici (tamponi di cellule epiteliali, sperma, succo prostatico, urina), utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi (PCR) in tempo reale con rilevazione in fluorescenza del prodotto amplificato.
Il set 1 è destinato all'uso con i ciclatori PCR a blocco: iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT-96 (DNA-Technology, Russia).
L'estrazione del DNA può essere eseguita con il "MOLgen Universal Extraction Kit".
Quando si utilizzano kit di estrazione NA di altri produttori, si raccomanda di utilizzare il campione di controllo interno (IC) prodotto da Adaltis.
Il set 1 contiene i reagenti necessari per 96 test, compresi i campioni di controllo.
Principio del metodo
La PCR in tempo reale si basa sulla rilevazione della fluorescenza prodotta da una molecola reporter, che aumenta con il procedere della reazione. La molecola reporter è una sonda DNA a doppia marcatura che si lega specificamente alla regione target del DNA degli agenti patogeni. Il segnale di fluorescenza aumenta a causa della separazione del colorante di fluorescenza e del quencher da parte dell'attività esonucleasica della DNA-polimerasi Taq durante l'amplificazione. La PCR consiste in cicli ripetuti: denaturazione termica del DNA, annealing del primer e sintesi della catena complementare.
Il valore di soglia del ciclo (Ct) è un numero di cicli al quale la fluorescenza generata all'interno di una reazione supera la soglia e il segnale di fluorescenza sale significativamente al di sopra del fondo.
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