"Molgen DNA Helicobacter pylori S1 Kit" è un kit di analisi per la rilevazione del DNA di Helicobacter pylori mediante PCR in tempo reale.
Introduzione
"Molgen DNA Helicobacter pylori S1 Kit" è stato progettato per rilevare il DNA di Helicobacter pylori isolato da campioni clinici utilizzando il kit di estrazione "Molgen Universal Extraction Kit". Il test si basa sul metodo della reazione a catena della polimerasi (PCR) in tempo reale con rilevamento fluorescente del prodotto amplificato.
Il kit contiene i reagenti necessari per 48 test, compresi i campioni di controllo.
Il kit è validato per l'uso con iCycler iQ, iCycler iQ5, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT-96 (DNA-Technology, Russia) o equivalenti.
"Molgen DNA Helicobacter pylori S1 Kit" è stato progettato per l'analisi di materiali clinici (campioni di tessuto gastrico).
Principio del metodo
La PCR in tempo reale si basa sulla rilevazione della fluorescenza, prodotta da una molecola reporter, che aumenta con il procedere della reazione. La molecola reporter è una sonda DNA a doppia marcatura, che si lega specificamente alla regione target del DNA del patogeno. Il segnale fluorescente aumenta grazie alla separazione del colorante fluorescente e del quencher da parte dell'attività esonucleasica della DNA-polimerasi Taq durante l'amplificazione. Il processo di PCR consiste in cicli ripetuti: denaturazione termica del DNA, annealing del primer e sintesi della catena complementare.
Il valore di soglia del ciclo - Ct - è il numero di cicli in cui la fluorescenza generata all'interno di una reazione supera la soglia di fluorescenza, un segnale fluorescente che aumenta significativamente rispetto alla fluorescenza di fondo. L'aumento del segnale di fluorescenza è dovuto all'uso di una sonda di ibridazione del DNA specifica per una determinata sequenza di DNA, che nel corso della reazione si lega a uno dei filamenti di DNA,
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