La L-tiroxina (T4) è un ormone sintetizzato e immagazzinato nella ghiandola tiroidea. La scissione proteolitica della tireoglobulina follicolare rilascia la T4 nel sangue. Oltre il 99% del T4 è legato reversibilmente a tre proteine plasmatiche nel sangue: la globulina legante la tiroxina (TBG) ne lega il 70%, la pre-albumina legante la tiroxina (TBPA) il 20% e l'albumina il 10%. Circa lo 0,03% della T4 è allo stato libero e non legato nel sangue in qualsiasi momento. Le malattie che influenzano la funzione tiroidea possono presentare un'ampia gamma di sintomi confusi. La misurazione della T4 totale mediante immunodosaggio è il test di screening più affidabile e conveniente per determinare la presenza di disturbi tiroidei nei pazienti. Livelli elevati di T4 sono stati riscontrati nell'ipertiroidismo dovuto alla malattia di Grave e alla malattia di Plummer e nella tiroidite acuta e subacuta. Bassi livelli di T4 sono stati associati a ipotiroidismo congenito, mixedema, tireoidite cronica (malattia di Hashimoto) e ad alcune anomalie genetiche.
PRINCIPIO DEL TEST
Nel T4 EIA, una certa quantità di anticorpo anti-T4 viene spalmata su pozzetti per microtitolazione. Una quantità misurata di siero del paziente e una quantità costante di T4 coniugato con perossidasi di rafano vengono aggiunti ai pozzetti per microtitolazione. Durante l'incubazione, la T4 e la T4 coniugata competono per i siti di legame limitati dell'anticorpo anti-T4. Dopo 60 minuti di incubazione a temperatura ambiente, i pozzetti vengono lavati 5 volte con acqua per rimuovere il coniugato T4 non legato. Viene quindi aggiunta una soluzione di reagente TMB e incubata per 20 minuti, con conseguente sviluppo di colore blu.
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