Kit di reagenti colorante

Acido cloridricoper istopatologiada ricerca

Il ferrocianuro di potassio è destinato alla colorazione dell'emosiderina e alla differenziazione dell'emosiderina da altri pigmenti. Principio: Il ferro dei tessuti (allo stato ferrico) può essere liberato dalle proteine con acido cloridrico diluito. Reagisce quindi con il ferrocianuro di potassio per formare il ferrocianuro ferrico blu, noto come reazione del blu di Prussia. Metodi: 1. Fissare i tessuti in formaldeide tampone neutra al 10%. Disidratare nel modo tipico e incorporare. 2. Deparaffinare i tessuti in acqua distillata. Sciacquare nuovamente con acqua distillata. 3. Mescolare un volume uguale di ferrocianuro di potassio al 2% e acido cloridrico al 2%. Far cadere la miscela sui vetrini per 20~30 minuti. Risciacquare con acqua distillata. 4. Controcolorare con la soluzione Nuclear Fast Red per 5~10 minuti e risciacquare brevemente con acqua distillata. 5. Disidratare in etanolo al 95% e in etanolo assoluto, schiarire in xilene e montare con mezzi di montaggio. Precauzioni: 1. I tessuti devono essere fissati con formaldeide neutra tamponata. Se si utilizza la formaldeide ordinaria, il tessuto deve essere fissato per un periodo più breve prima di essere incorporato. I tessuti fissati a lungo in formaldeide comune reagiscono male. Evitare l'uso di fissativi contenenti cromato. 2. È preferibile utilizzare acido cloridrico di grado analitico o superiore, poiché l'acido cloridrico di grado inferiore contiene tipicamente impurità di ferro che possono portare a falsi positivi. 3. Tutti i contenitori/utensili utilizzati durante l'intera procedura devono essere puliti. Evitare l'uso di strumenti in ferro. 4. Per le fasi precedenti alla reazione con il ferro, risciacquare solo con acqua distillata per evitare che il ferro presente nell'acqua di rubinetto si combini con il sale di calcio presente nei tessuti, dando luogo a falsi positivi.