Il colorante Sudan Black è destinato alla colorazione neutra dei grassi.
Principio:
Si ritiene che la colorazione dei lipidi dipenda dalle proprietà fisiche della soluzione o dall'adsorbimento. Quando il colorante Sudan Black viene disciolto in un solvente organico, presenta una maggiore solubilità nei lipoidi dei tessuti congelati rispetto ai solventi originali. Pertanto, durante la colorazione, i coloranti migrano nei lipidi dai solventi organici, dando luogo alla colorazione dei lipidi.
Metodi:
1. Tagliare il tessuto congelato a 6~10μm, sciacquare in acqua distillata.
2. Sciacquare il tessuto in etanolo al 50-70% per 20-30 secondi.
3. Porre in soluzione di Sudan Black B per 3~5 minuti.
4. Differenziare in etanolo al 50~70% per alcuni secondi fino a rimuovere il colore sciolto sui vetrini.
5. Sciacquare in acqua distillata.
6. Controcolorare con la soluzione Nuclear Fast Red per 5 minuti.
7. Sciacquare in acqua distillata per 1~2 minuti.
8. Rimuovere l'acqua in eccesso intorno al vetrino e asciugare all'aria.
9. Montare con arabina o gelatina di glicerina.
Precauzioni:
1. Per visualizzare i lipidi, colorare i tessuti congelati invece di quelli in paraffina, poiché i lipidi sono facilmente solubili nei solventi organici.
2. Il tessuto congelato utilizzato per la colorazione dei lipidi non deve essere troppo sottile. In caso contrario, il contenuto lipidico potrebbe andare perso.
3. La macchia non rimarrà a lungo, quindi osservate e fotografate il prima possibile.
---