Il colorante PAS Hepatin è destinato alla colorazione dell'epatina. Il tessuto viene ossidato in acido periodico e il colore si sviluppa dopo l'aggiunta di Fucshin incolore. Questa reazione è utilizzata principalmente per esaminare il poliosio. Anche per funghi e batteri la reazione risulta positiva.
Principio:
L'acido periodico è un ossidante in grado di distruggere il legame di carbonio del poliosio. In primo luogo, i tessuti vengono ossidati in una soluzione di acido periodico per rompere il legame di carbonio del gruppo glicolico o dell'ossidrile ammoniacale nel poliosio del tessuto, con conseguente formazione di un composto aldeidico. Successivamente, l'aldeide libera esposta reagisce con la Fucshin incolore per formare un nuovo composto rosso-fucsia.
Metodi:
1. Deparaffinare le sezioni in acqua deionizzata.
2. Sciacquare in acqua distillata per 1~2 minuti.
3. Ossidare le sezioni in acido periodico allo 0,5% per 10 minuti.
4. Sciacquare accuratamente in acqua distillata e asciugare le sezioni con carta assorbente.
5. Colorare con il reagente di Schiff (soluzione incolore di Fucshin) per 10~15 minuti.
6. Lavare in acqua corrente per 10 minuti.
7. Colorare il nucleo con ematossilina per 1~2 minuti.
8. Disidratare con alcool al 95% e al 100%, schiarire in xilene.
9. Montare con supporti di montaggio.
Precauzioni:
1. Conservare la soluzione di Fucshin incolore in frigorifero e portarla a temperatura ambiente prima dell'uso. Dopo ogni utilizzo, versarla nuovamente nel flacone originale e conservarla in frigorifero. Seguendo la procedura sopra descritta, la soluzione Colorless Fucshin può essere riutilizzata più volte fino alla comparsa della rosetta.
2. Il tempo di colorazione della soluzione Colorless Fucshin dipende dalla temperatura ambiente. In estate sono sufficienti 10 minuti; in inverno, invece, il tempo dovrebbe essere prolungato fino a 20 minuti.
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