Il rosso petrolio è destinato alla colorazione di grassi neutri.
Principio:
Si ritiene che la colorazione dei lipidi sia legata alle proprietà fisiche della soluzione o all'adsorbimento. I coloranti presentano una maggiore solubilità nelle sostanze lipoidi dei tessuti congelati rispetto ai solventi originali. Pertanto, durante la colorazione, i coloranti migrano nei lipidi dai solventi organici, dando luogo alla colorazione dei lipidi.
Metodi:
1. Tagliare il tessuto congelato a uno spessore di 6~10μm, sciacquare brevemente in acqua distillata.
2. Sciacquare il tessuto in isopropanolo al 60% per 20~30 secondi.
3. Preparare la soluzione di lavoro di Oil Red O con 6 mL di soluzione madre di Oil Red O e 4 mL di acqua deionizzata. Mescolare bene e lasciare riposare per 10 minuti. Colorare con la soluzione di lavoro Oil Red O per 5~10 minuti.
4. Sciacquare in isopropanolo al 60% per alcuni secondi per rimuovere l'eccesso di colorante. Risciacquare in acqua distillata.
5. Colorare i nuclei con la soluzione di ematossilina Mayer.
6. Differenziare i vetrini in acido cloridrico all'1% per alcuni secondi.
7. Blu in acqua di rubinetto o in una soluzione diluita di carbonato di litio per 10 minuti. Rimuovere l'acqua in eccesso.
8. Montare con arabina o gelatina di glicerina.
Precauzioni:
1. Per visualizzare i lipidi, colorare il tessuto congelato anziché quello in paraffina, poiché i lipidi sono facilmente solubili nei solventi organici.
2. Il tessuto congelato utilizzato per la colorazione dei lipidi non deve essere troppo sottile. In caso contrario, il contenuto lipidico andrebbe perso.
3. Il tempo di controcolorazione con ematossilina di Mayer non deve essere troppo lungo.
4. La colorazione non durerà troppo a lungo, quindi osservate e fotografate il prima possibile.
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