Questo kit HTRF è stato progettato per rilevare le proteine del nucleocapside del SARS-CoV-2 nei lisati o nel surnatante cellulare, come marcatore dell'infezione virale.
Panoramica
La proteina N del SARS-CoV-2 è il costituente monomerico di base del nucleocapside oligomerico del coronavirus. Questa proteina è un immunogeno importante, espresso prevalentemente nelle prime fasi dell'infezione virale e presente fin dal primo giorno nel siero dei pazienti infetti. Pertanto, la proteina N del SARS-CoV-2 è un marcatore affidabile dell'infezione virale e un possibile candidato immunogeno per lo sviluppo di un vaccino.
Altre specifiche
Dimensione dell'unità 500 punti di analisi
Come funziona
Le particelle di SARS-CoV-2 vengono rilevate nei lisati cellulari mediante un immunodosaggio a sandwich con un anticorpo monoclonale anti-nucleocapside, marcato con terbio-criptato o d2, che garantisce la qualità del saggio, la riproducibilità e la qualità del segnale. Il segnale HTRF specifico generato è proporzionale alla quantità di proteine nucleocapside.
Il protocollo del saggio, che utilizza una piastra a piccolo volume da 384 pozzetti o una piastra a basso volume da 96 pozzetti (20 µL finali), è descritto a destra. 16 µL di lisati cellulari o di controllo vengono dispensati direttamente nella piastra di rilevamento per la rilevazione con i reagenti HTRF. Gli anticorpi marcati con donatore e accettore HTRF possono essere premiscelati e aggiunti in un'unica fase di dispensazione per semplificare ulteriormente la procedura di analisi (4 µL), oppure separatamente (2 µL).
Rilevamento del nucleocapside ricombinante di SARS-CoV-2
16 µL di proteina ricombinante nel tampone di lisi #5 sono stati dispensati in una micropiastra bianca a basso volume prima dell'aggiunta di 4 µL di reagenti premiscelati per la rilevazione del capside HTRF anti SARS-CoV2. Il segnale HTRF è stato registrato dopo 2 ore di incubazione a temperatura ambiente.
Curva standard del kit del capside
Volume finale del saggio - 20 µL
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