Questo kit HTRF è stato progettato per rilevare le proteine SARS-CoV-2 Spike S1 nei lisati o nel surnatante cellulare, come marcatore dell'infezione virale.
Panoramica
La proteina SARS-CoV-2 Spike S1 è una delle due parti della proteina Spike (S) del virus. La subunità S1 è responsabile dell'interazione del virus con i recettori transmembrana dell'enzima di conversione dell'angiotensina 2 (ACE2) delle cellule ospiti, mentre la subunità S2 è in grado di apportare cambiamenti conformazionali che consentono la fusione dell'involucro della particella virale con la membrana della cellula ospite in seguito al legame S1/ACE2. Per questo motivo, la proteina S1 viene studiata attentamente per il suo ruolo nell'infezione virale ed è un marcatore affidabile dell'infezione, nonché un potenziale bersaglio immunogeno per il vaccino.
Altre specifiche
Dimensione dell'unità 500 punti di analisi
Come funziona
Le particelle di SARS-CoV-2 vengono rilevate nei lisati cellulari mediante un immunodosaggio a sandwich con un anticorpo monoclonale anti-S1, marcato con terbio-criptato o d2, che garantisce la qualità del saggio, la riproducibilità e la qualità del segnale. Il segnale HTRF specifico generato è proporzionale alla quantità di proteine S1.
Il protocollo del saggio, che utilizza una piastra a piccolo volume da 384 pozzetti o una piastra a basso volume da 96 pozzetti (20 µL finali), è descritto a destra. 16 µL di lisati cellulari o di controllo vengono dispensati direttamente nella piastra di rilevamento per la rilevazione con i reagenti HTRF. Gli anticorpi marcati con donatore e accettore HTRF possono essere premiscelati e aggiunti in un'unica fase di dispensazione per semplificare ulteriormente la procedura di analisi (4 µL), oppure separatamente (2 µL).
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