Kit di test da ricerca HTRF

di proteine totalidi cellule

Questo kit HTRF rileva STAT6 cellulare e può essere utilizzato come test di normalizzazione con il nostro kit fosfo-STAT6 per una lettura ottimale della segnalazione JAK/STAT. Panoramica Il kit di analisi cellulare Total STAT6 è stato progettato per monitorare il livello di espressione di STAT6, sia fosforilato che non fosforilato. È compatibile con il nostro kit Phospho-STAT6 e consente di analizzare le proteine fosforilate e totali da un singolo campione per una lettura ottimale della via di segnalazione JAK/STAT. Specifiche tecniche Altre specifiche Dimensione dell'unità 500 punti di analisi Come funziona Principio del dosaggio di STAT6 totale Il saggio Total STAT6 quantifica il livello di espressione di STAT6 in un lisato cellulare. A differenza del Western Blot, il test è interamente basato su piastra e non richiede gel, elettroforesi o trasferimento. Il test Total-STAT6 utilizza due anticorpi marcati: uno accoppiato a un fluoroforo donatore, l'altro a un accettore. Entrambi gli anticorpi sono altamente specifici per un epitopo distinto della proteina. In presenza di STAT6 in un estratto cellulare, l'aggiunta di questi coniugati porta il fluoroforo donatore in stretta vicinanza con l'accettore e quindi genera un segnale FRET. La sua intensità è direttamente proporzionale alla concentrazione della proteina presente nel campione e fornisce un mezzo per valutare l'espressione della proteina in un formato di analisi senza lavaggio. Protocollo del saggio STAT6 totale su 2 piastre Il protocollo a 2 piastre prevede la coltura delle cellule in una piastra a 96 pozzetti prima della lisi, quindi il trasferimento dei lisati in una piastra di rilevamento a basso volume a 384 pozzetti prima dell'aggiunta dei reagenti di rilevamento Total-STAT6 HTRF. Questo protocollo consente di monitorare la vitalità e la confluenza delle cellule.