Una colorazione di fucsina basica modificata (senza riscaldamento) per l'identificazione di batteri acidofili come il Mycobacterium tuberculosis.
Principio:
Questo kit di colorazione si basa sulla colorazione di Ziehl-Neelsen (una soluzione di carbofulfuchsina) raccomandata dall'OMS. I batteri acido-resistenti come Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae sono difficili da colorare a causa della loro capsula lipoide nella parete cellulare. Tuttavia, una volta che la capsula lipoide viene colorata con un colorante potenziato come la carbolfuchsina, il composto di nuova formazione resisterà alla decolorazione da parte dell'acido-alcool e manterrà il colore originale della colorazione (rosso), potendo così essere facilmente differenziato da altri microrganismi che ancora adsorbono il controcolore blu.
Metodi:
Colorazione a freddo:
1. Fissare lo striscio con la fiamma e poi aggiungere Carbolfuchsin per colorare per 5 minuti o più (senza riscaldare).
2. Sciacquare delicatamente con acqua (tamponare delicatamente il vetrino con carta bibula)
3. Decolorare per 2 minuti con alcool acido.
4. Risciacquare delicatamente con acqua (se il colore rosso è ancora visibile sulla superficie del campione, aggiungere nuovamente alcol acido fino a decolorare completamente il colore rosso).
5. Applicare il blu di metilene per 30 secondi. Sciacquare delicatamente con acqua e asciugare all'aria. Esaminare il vetrino finito al microscopio.
Precauzioni:
1. Questo metodo viene utilizzato anche per la colorazione a caldo.
2. Quando il decolorante è esaurito, si consiglia di acquistare la soluzione da Baso.
3. Dopo ogni utilizzo, tappare immediatamente il flacone del reagente per evitare la vaporizzazione.
4. Per i campioni di espettorato, lo striscio deve essere adeguatamente ispessito per aumentare il tasso di rilevazione. Per ottenere uno striscio più spesso, è necessario controllare il tempo di controcolorazione. Se lo sfondo è troppo scuro, l'esame microscopico ne risentirà.
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