Una procedura di colorazione rapida per classificare i batteri in base alle caratteristiche della loro parete cellulare. In base ai risultati della colorazione, i batteri possono essere suddivisi in due gruppi diversi: Gram positivi (viola) e Gram negativi (rossi).
Principio:
La colorazione di Gram è stata ideata empiricamente da Christian Gram, un medico danese, nel 1884. Quando i batteri vengono colorati con alcuni coloranti basici (come il cristalvioletto del colorante di Gram rapido), le cellule con un elevato contenuto di peptidoglicano (Gram-positive) nella loro parete cellulare resistono alla decolorazione con solventi organici come etanolo o acetone, mentre le specie Gram-negative (con un sottile strato di peptidoglicano nella parete cellulare) possono essere facilmente decolorate.
Metodi:
1. Colorare il vetrino del campione con Crystal Violet per 10 secondi. Sciacquare delicatamente con acqua e rimuovere l'acqua in eccesso.
2. Applicare la soluzione di iodio per 10 secondi. Sciacquare delicatamente con acqua e rimuovere l'acqua in eccesso.
3. Aggiungere il decolorante per 10~20 secondi. Sciacquare delicatamente con acqua e rimuovere l'acqua in eccesso.
4. Controcolorare con la soluzione di Safranin per 10 secondi. Sciacquare delicatamente con acqua.
5. Tamponare il vetrino con carta bibula (o lasciare asciugare all'aria), quindi esaminare il vetrino al microscopio.
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