L'RNA totale di riferimento universale è un RNA totale di controllo derivato da fonti di tessuto intero. L'RNA totale di riferimento specifico per ogni specie è ottenuto raggruppando gli estratti di RNA totale da una collezione di tessuti diversi, fornendo così la più ampia copertura di geni espressi. Con ciascun campione di RNA totale di riferimento, è possibile confrontare facilmente i dati di microarray o PCR in tempo reale generati da esperimenti diversi. Per gli esperimenti di microarray, è sufficiente ibridare una sonda di RNA totale di riferimento con un microarray ogni volta che si esegue un esperimento, quindi utilizzare il segnale di controllo per normalizzare i risultati. Forniamo una quantità di RNA totale di riferimento sufficiente per un massimo di 80 esperimenti di microarray, a seconda della tecnica di etichettatura. Poiché queste miscele di RNA sono preparate su scala industriale, la variabilità da lotto a lotto è minima. Il nostro RNA totale di riferimento è l'approccio migliore per la creazione di database di espressione genica per confrontare i profili di espressione di diversi tessuti o linee cellulari.
Inoltre, l'RNA totale di riferimento umano qPCR può essere utilizzato nell'analisi dell'espressione genica per confrontare i dati di una serie di esperimenti qPCR. L'RNA totale di riferimento umano qPCR è preparato raggruppando l'RNA totale di una collezione di diversi tessuti umani, quindi fornisce una copertura genica più ampia rispetto alle miscele di RNA di riferimento preparate da linee cellulari.
Rappresentazione genica ottimizzata
Nello sviluppo di questi standard di RNA, abbiamo confrontato i risultati di diverse combinazioni di tessuti per identificare la miscela più rappresentativa. Rispetto a uno standard di RNA della concorrenza preparato da linee cellulari, abbiamo riscontrato che l'uso di RNA in pool estratto da tessuti interi ha fornito una migliore rappresentazione dei geni e intensità di segnale più omogenee per tutti i geni.
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