La miscela PrimeDirect Probe RT-qPCR è stata progettata per la RT-PCR in tempo reale in un solo passaggio tramite rilevamento della sonda (metodo della 5′-nucleasi). Questo prodotto è fornito come premiscela 2X per facilitare la preparazione delle miscele di reazione. Richiede solo l'aggiunta del primer, della sonda e del campione e la RT-qPCR può essere eseguita aggiungendo il campione direttamente alla miscela di reazione, senza fasi di purificazione dell'acido nucleico.
Il protocollo consente di eseguire tutte le fasi, dall'estrazione dell'acido nucleico alla trascrizione inversa e alla qPCR, in un'unica provetta, riducendo notevolmente il tempo di lavoro e il rischio di contaminazione. Il flusso di lavoro a provetta singola consente anche di rilevare virus a RNA con strutture complesse di ordine superiore.
La PCR ad alta efficienza dopo la sintesi del cDNA rileva l'amplificazione del DNA in tempo reale misurando l'aumento della fluorescenza della sonda. Poiché questo prodotto è altamente resistente a vari inibitori della PCR, come l'eparina (sangue) e l'acido umico (terreno), può essere utilizzato per rilevare direttamente agenti patogeni, compresi virus e batteri, in vari campioni biologici e per analizzare direttamente l'espressione genica nelle cellule.
La miscela PrimeDirect Probe RT-qPCR è stata progettata per la RT-PCR in tempo reale in un solo passaggio attraverso il rilevamento della sonda (metodo della 5'-nucleasi). Questo prodotto è fornito come premiscela 2X per facilitare la preparazione delle miscele di reazione. Richiede solo l'aggiunta del primer, della sonda e del campione e la RT-qPCR può essere eseguita aggiungendo il campione direttamente alla miscela di reazione, senza dover ricorrere a fasi di purificazione dell'acido nucleico.
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