Il test rapido prevede un semplice protocollo di aggiunta di due reagenti
Il substrato reagisce direttamente con l'H2O2; non è necessario l'HRP come enzima di accoppiamento
Panoramica
Il ROS-Glo™ H₂O₂ Assay è un test bioluminescente omogeneo, rapido e sensibile che misura il livello di perossido di idrogeno (H₂O₂), una specie reattiva dell'ossigeno (ROS), direttamente in coltura cellulare o in reazioni enzimatiche definite. Un substrato di luciferina derivatizzato viene incubato con il campione e reagisce direttamente con H₂O₂ per generare un precursore di luciferina. L'aggiunta della soluzione di rivelazione ROS-Glo™ converte il precursore in luciferina e fornisce la luciferasi ricombinante Ultra-Glo™ per produrre un segnale luminoso proporzionale al livello di H₂O₂ presente nel campione.
Il substrato H₂O₂ reagisce direttamente con l'H₂O₂ per creare il precursore della luciferina. La soluzione di rilevamento del substrato ROS-Glo™ converte il precursore di luciferina in luciferina e fornisce anche la luciferasi Ultra-Glo™ per produrre luce. Il segnale luminoso è proporzionale alla quantità di H₂O₂ nel pozzetto del campione.
Panoramica del protocollo di dosaggio ROS-Glo™ H₂O₂ per la rilevazione cellulare o biochimica
Il test segue un semplice protocollo di aggiunta a due reagenti che non richiede la manipolazione del campione. Il substrato ROS-Glo™ H₂O₂ può essere aggiunto ai pozzetti del saggio con il trattamento o al termine del periodo di incubazione del trattamento e i dati possono essere registrati in meno di 2 ore dall'aggiunta del reagente.
Esecuzione di saggi enzimatici o cellulari in piastre da 96 e 384 pozzetti
Il trattamento con menadione delle cellule K562 ha determinato un aumento dei ROS dipendente dalla concentrazione, rilevato con il ROS-Glo™ H₂O₂ Assay.
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