Kit di reagenti DNA polimerasi NZYSupreme

per rilevamento di mutazionienzimatico

Il kit di mutagenesi NZYSupreme è progettato per effettuare mutazioni puntiformi e cancellare o inserire nucleotidi singoli o multipli in una sequenza di DNA. Il sistema richiede la fornitura di due primer oligonucleotidici sintetici contenenti la mutazione desiderata. Dettagli Il kit di mutagenesi NZYSupreme fornisce un metodo semplice e altamente efficiente per generare mutazioni puntiformi o per eliminare/inserire nucleotidi singoli o multipli in qualsiasi tipo di DNA plasmidico mediante PCR. Questo kit di mutagenesi è stato recentemente sviluppato per ridurre i tempi di lavoro e aumentare l'efficienza dell'editing del DNA. Il sistema richiede la fornitura di due primer oligonucleotidici sintetici parzialmente complementari contenenti la mutazione desiderata. L'incorporazione di questi primer oligonucleotidici mutati con la Supreme NZYProof DNA polimerasi, una polimerasi ingegnerizzata ad alta precisione, genera un plasmide mutato contenente nicks sfalsati, che resiste alla digestione della Dpn I (poiché il DNA sintetico non è metilato). Dopo il trattamento con Dpn I, il plasmide mutato risultante viene recuperato attraverso la trasformazione di cellule competenti NZYStar. Per una presentazione schematica del protocollo di mutagenesi, si veda la Figura 1. Il DNA isolato da ceppi di Escherichia coli, compresi JM101 e SCS110, non è un templato adatto per la reazione di mutagenesi. Componenti - Miscela Master Supreme NZYProof 2x incolore - Dpn I (10 U/µL) - Plasmide di controllo - Miscela di primer di controllo della mutagenesi - Cellule competenti Plasmide di controllo (0,1 ng/µL) (*) (*) fornito solo nel kit MB44702 Ulteriori informazioni Condizioni di spedizione Ghiaccio secco Applicazione Mutagenesi sito-diretta Caratteristiche Mutagenesi di plasmidi <15 kb; Veloce Categoria di prodotto Clonazione e mutagenesi del DNA