NZY First-Strand cDNA Synthesis Kit, oligo separati, è un sistema che include tutti i componenti necessari per sintetizzare cDNA first-strand. Il kit consente di reagire ad alte temperature, il che è utile quando si parte da RNA difficili e complessi.
Dettagli
NZY First-Strand cDNA Synthesis Kit, separate oligos, è un sistema che include tutti i componenti necessari per sintetizzare cDNA first-strand, ad eccezione dell'RNA templato. Gli esameri casuali e i primer Oligo(dT)18 sono forniti in provette separate per offrire la possibilità di scegliere il primer appropriato per avviare la reazione di trascrizione inversa. Il cDNA a singolo filamento risultante è adatto all'uso nella PCR quantitativa inversa in tempo reale (RT-qPCR). Il kit NZY per la sintesi di cDNA a primo filamento, con oligo separati, è formulato per fornire rese elevate di prodotti cDNA a lunghezza completa e per aumentare la sensibilità nella RT-qPCR. Il materiale di partenza può variare da 10 pg a 5 µg di RNA totale. Oltre agli esameri casuali e ai primer Oligo(dT)18, il kit comprende NZYRT 2× Master Mix, senza oligo, che contiene dNTP, MgCl2 e un tampone RT ottimizzato; 10× Annealing Buffer e NZYRT Enzyme Mix. La miscela enzimatica NZYRT comprende sia la trascrittasi inversa NZY (RNasi H meno) sia l'inibitore di ribonucleasi NZY per proteggere l'RNA dalla degradazione dovuta alla contaminazione da ribonucleasi. La RNasi H (da E. coli) è fornita in una provetta separata per degradare specificamente l'RNA G604template negli ibridi cDNA-RNA dopo la sintesi del cDNA a primo filamento. Questa procedura migliorerà la sensibilità delle successive reazioni di RT-qPCR poiché i primer PCR si legheranno più facilmente al cDNA.
Componenti
- Miscela enzimatica NZYRT
- NZYRT 2x Master Mix, senza oligo
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