Questo prodotto è una miscela master in un unico tubo per l'eliminazione del DNA genomico e la trascrizione inversa, che consente di ottenere contemporaneamente la rimozione del DNA genomico e la sintesi del cDNA in un'unica fase, evitando efficacemente il rischio di contaminazione del campione e la degradazione dell'RNA causata da aggiunte complesse. Il prodotto contiene una trascrittasi inversa RScript II altamente potente, che sintetizza il cDNA a primo filamento da quantità molto basse di RNA totale o mRNA poli(A), rendendolo adatto alla trascrizione inversa di modelli di RNA con alto contenuto di GC e strutture complicate. L'enzima ha una stabilità termica notevolmente migliorata, in grado di tollerare la temperatura di reazione fino a 65°C e di ottenere una maggiore resa del cDNA sintetizzato. Con l'aggiunta della dsDNasi sensibile al calore, il DNA genomico residuo può essere rimosso dal campione a temperatura ambiente. L'inattivazione a 50°C non influisce sul cDNA. Il tampone RT ottimizzato 5×RScript II All-in-One è premiscelato con il primer casuale e l'oligo18 (dT), compatibile con la digestione genomica e la sintesi di cDNA. Le trascrizioni inverse sono compatibili con la qPCR con colorante e sonda per la successiva analisi dell'espressione genica.
Prestazioni della trascrizione inversa di RK003-0050
Utilizzando 100 ng, 10 ng e 1 ng di RNA di cellule Hela come templato, RK003-0050 è stato confrontato con due concorrenti in reazioni di trascrizione inversa seguite da qPCR. Le curve di amplificazione hanno mostrato prestazioni eccellenti, soprattutto a basse concentrazioni di templato, superando i concorrenti.
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