Vazyme ClonExpress II One Step Cloning è una tecnologia di clonazione semplice, veloce ed efficiente che consente l'inserimento direzionale di qualsiasi prodotto di DNA amplificato in qualsiasi vettore linearizzato in qualsiasi sito. In primo luogo, il vettore viene linearizzato nel sito di clonazione. Una piccola sequenza sovrapposta a ciascuna estremità del sito di clonazione viene aggiunta all'inserto mediante PCR. L'inserto e il vettore linearizzato, con sequenze sovrapposte di 15 bp - 20 bp su entrambe le estremità 5'- e 3'- rispettivamente, vengono mescolati in un rapporto appropriato e incubati con ricombinasi Exnase II a 37℃ per 30 minuti.
ClonExpress II è un nuovo kit di clonazione, indipendente dalla DNA ligasi, che riduce significativamente le colonie autolegate e porta a un tasso di veri positivi > 95%. L'Exnase II potenziata e il tampone altamente ottimizzato migliorano significativamente l'efficienza della ricombinazione e la tolleranza alle impurità. Sia il vettore linearizzato che i prodotti PCR dell'inserto possono essere utilizzati direttamente per la ricombinazione senza purificazione, semplificando notevolmente le procedure.
Caratteristiche del prodotto
Semplice, veloce, efficiente, adatto a qualsiasi vettore;
Non è necessario considerare il sito di restrizione trasportato dall'inserto;
Clonazione efficiente di frammenti di DNA da 50 bp a 10 kb;
Il vettore di clonazione linearizzato e i prodotti di PCR possono essere clonati direttamente senza purificazione;
Nessuna ligasi, nessuna autoconnessione, tasso di positività >95%.
---