Kit di reagenti in soluzione E.Z.N.A.®

per PCRper acidi nucleicibatteriologico

Isolate il DNA plasmidico a bassa endotossina (<1EU/µg) da colture batteriche fino a 5 mL utilizzando le mini-colonne di spin Panoramica I plasmidi isolati con le procedure di purificazione tradizionali contengono normalmente alti livelli di endotossine (note anche come lipopolisaccaridi o LPS) che possono interferire significativamente con gli esperimenti di trasfezione a valle. È possibile utilizzare fino a 5 mL di colture overnight per i plasmidi ad alto numero di copie e 10 mL per quelli a basso numero di copie. L'E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit I integra un'efficiente fase di rimozione delle endotossine nella procedura di purificazione del plasmide per produrre plasmidi di alta qualità (<0,1 EU/µg) per una trasfezione efficiente. Le cellule batteriche vengono lisate con il metodo di lisi alcalino-SDS. Il lisato cellulare così ottenuto viene trattato con il reagente ETR per rimuovere efficacemente le endotossine. Dopo aver regolato le condizioni di legame, il lisato cellulare viene applicato alla colonna HiBind® DNA e il DNA purificato viene eluito dalla membrana della colonna. Rapido - 30 minuti o meno Sicuro - Nessuna estrazione con fenolo/cloroformio Versatile - Sono disponibili i formati spin e vacuum Alta qualità - Endotossine ridotte in modo efficiente (<0,1 EU/µg) Specifiche tecniche CARATTERISTICHE - SPECIFICHE Applicazione a valle - Trasfezione sensibile di linee cellulari; terapia genica, ecc. Materiale di partenza - 1-5 mL di coltura LB con OD600 compresa tra 2 e 3 o equivalente Tipo di plasmide - DNA cosmico, a bassa copia e ad alta copiatura Modalità di trattamento - Manuale, centrifugazione Produttività - 1 - 24 Tecnologia di legame del DNA - Colonna mini spin di silice Metodo di pulizia del lisato - Centrifugazione Tempo di elaborazione - <30 minuti Resa - 15-25 µg per un alto numero di copie; 0,1-5 µg per un basso numero di copie Altro - Include la fase di rimozione dell'endotossina