Kit di reagenti in soluzione E.Z.N.A.®

da ricercaper PCRper acidi nucleici

Isolate il DNA plasmidico a bassa endotossina (<1EU/µg) da un massimo di 200 ml di colture batteriche utilizzando le colonne spin maxi Panoramica Il kit E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Maxi fornisce un metodo efficiente per l'isolamento su larga scala di DNA plasmidico a bassa endotossina. Il sistema utilizza siringhe filtranti per la rimozione del lisato invece della centrifugazione per eliminare rapidamente i lisati batterici dopo la lisi alcalina. Dopo la pulizia del lisato, le endotossine vengono rimosse e il protocollo segue una semplice procedura "bind-wash-elute" per ottenere DNA plasmidico di alta qualità. Le rese variano a seconda del numero di copie plasmidiche, del ceppo di E. coli e delle condizioni di crescita. 50-200 mL di coltura batterica in terreno LB producono in genere 0,6-1,2 mg di DNA plasmidico ad alto numero di copie. Quando si lavora con plasmidi a basso numero di copie, si possono trattare fino a 500 mL di coltura. Il sistema utilizza la tecnologia della centrifugazione o del vuoto per la purificazione del plasmide ed elimina le colonne a flusso gravitazionale che richiedono la precipitazione in alcol. Il DNA plasmidico purificato è adatto per applicazioni sensibili a valle, come la trasfezione di cellule di mammifero, il clonaggio, il sequenziamento automatizzato del DNA a fluorescenza (le letture tipiche superano gli 800 bp), il sequenziamento di prossima generazione, la digestione con enzimi di restrizione, la legatura, la PCR, la trascrizione in vitro, la trasformazione, ecc. Rapido - Purificazione del DNA plasmidico in < 45min Sicuro - Nessuna estrazione di fenolo/cloroformio Versatile - Sono disponibili i formati spin e vacuum Alta qualità - DNA plasmidico di grado transfezione, a bassa endotossina (< 1 EU/µg) Specifiche tecniche Non utilizzabile nelle procedure diagnostiche. CARATTERISTICHE - SPECIFICHE Applicazioni a valle - Trasfezione, terapia genica, clonazione, trascrizione in vitro, generazione successiva