Kit di reagenti in soluzione E.Z.N.A.®

per PCRper acidi nucleiciNGS

Isolate fino a 200 µg di DNA plasmidico di grado di trasfezione e a bassa endotossina (<1EU/µg) da colture batteriche di 15-50 mL utilizzando filtri a siringa per la pulizia del lisato e colonne midi spin Panoramica Il kit E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Midi fornisce un metodo efficiente per l'isolamento su larga scala di DNA plasmidico a bassa endotossina. Il sistema utilizza siringhe filtranti per la rimozione del lisato invece della centrifugazione per eliminare rapidamente i lisati batterici dopo la lisi alcalina. Dopo la pulizia del lisato, le endotossine vengono rimosse e il protocollo segue una semplice procedura "bind-wash-elute" per ottenere DNA plasmidico di alta qualità. Le rese variano a seconda del numero di copie plasmidiche, del ceppo di E. coli e delle condizioni di crescita. 15-50 mL di colture batteriche in terreno LB producono in genere fino a 200 µg di DNA plasmidico ad alto numero di copie. Quando si lavora con plasmidi a basso numero di copie, si possono trattare fino a 100 ml di coltura. Il sistema utilizza la tecnologia della centrifugazione o del vuoto per la purificazione del plasmide ed elimina le colonne a flusso gravitazionale che richiedono la precipitazione in alcol. Il DNA plasmidico purificato è adatto per applicazioni sensibili a valle, come la trasfezione di cellule di mammifero, il clonaggio, il sequenziamento automatizzato del DNA a fluorescenza (le letture tipiche superano gli 800 bp), il sequenziamento di prossima generazione, la digestione con enzimi di restrizione, la legatura, la PCR, la trascrizione in vitro, la trasformazione, ecc. Rapido - Purificazione del DNA plasmidico in < 45 min Sicuro - Nessuna estrazione di fenolo/cloroformio Versatile - Sono disponibili i formati spin e vacuum Alta qualità - DNA plasmidico di grado transfezione, a bassa endotossina (< 1 EU/µg) Specifiche Non utilizzabile nelle procedure diagnostiche.