Spiana la strada all'analisi funzionale di una specifica domanda di ricerca.
Uso previsto
Questo kit FluoroSpot Path è destinato all'enumerazione delle cellule che secernono IFN-γ e IL-2 umani in risposta a peptidi di TB utilizzando il saggio FluoroSpot. Solo per uso di ricerca. Non per l'uso in procedure diagnostiche.
Composizione del pool di peptidi
I pool di scansione sono costituiti da peptidi sintetici di 15 meri sovrapposti a 11 aminoacidi, che coprono le proteine complete. Il pool di scansione ESAT-6 è derivato dalla proteina target antigenica secretoria precoce e contiene 21 peptidi. Il pool di scansione CFP-10 deriva dalla proteina del filtrato di coltura e contiene 23 peptidi. Infine, il pool di scansione EspC deriva dalla proteina associata alla secrezione ESX-1 e contiene 23 peptidi.
Prestazioni
PBMC umane (250.000 cellule/pozzetto) provenienti da un individuo con tubercolosi latente sono state incubate per una notte in assenza o in presenza dei pool di scansione ESAT-6 e CFP-10 (Mabtech). Il numero di cellule che secernono IFN-γ e/o IL-2 è stato analizzato mediante FluoroSpot. Sono state determinate le cellule secernenti citochine singole e quelle a doppia secrezione. Il centro di spot è stato utilizzato per identificare gli spot delle cellule a doppia secrezione, visualizzati in una sovrapposizione di immagini di LED490, FITC (IFN-γ) e LED550,Cy3 (IL-2). L'analisi degli spot è stata effettuata con Mabtech IRIS.
IFN-γ
Descrizione dell'analita -
L'interferone-γ (IFN-γ) è l'unico interferone di tipo II. Questa citochina proinfiammatoria è secreta dalle cellule T e dalle cellule NK attivate. Attiva i macrofagi e le cellule endoteliali e regola le risposte immunitarie influenzando le APC, le cellule T e le cellule B. La produzione di IFN-γ da parte delle cellule T helper e delle cellule T citotossiche è un segno distintivo del fenotipo Th1.
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