La proteinasi K è una proteasi endolytic che fende i legami peptidici sui lati carbossilici degli aminoacidi alifatici, aromatici o idrofobi. La proteinasi K è classificata come proteasi della serina. Il più piccolo peptide da idrolizzare da questo enzima è un tatrapeptide.
Caratteristiche
• Soluzione pronta per l'uso
• Proteinasi recombinante K
• Attivo in una vasta gamma di prodotti di reazione
Applicazioni
• Isolamento del DNA genomico dalle cellule di cultura e dai tessuti
• Rimozione delle dnasi e dei rnasi quando isolano DNA e RNA dai tessuti o dalle linee cellulari
• Determinazione della localizzazione degli enzimi
• Miglioramento dell'efficienza di clonazione dei prodotti di PCR
Controllo di qualità
Attività della dnasi: Nessuno attività enzimatica rilevabile dopo 6 ore di incubazione con il DNA del λ a 37ºC.
Attività della RNAsi: Nessuno attività rilevabile della ribonucleasi dopo 16 ore di incubazione con RNA a 25ºC.
Fonte
Dalle cellule di lievito con il gene clonato che codifica geneticamente ha costruito la proteasi endolytic dell'album di Engyodontium (album di Tritirachium).
Peso molecolare
monomero di kDa 29,3.
Definizione dell'unità di attività
Un'unità dell'enzima libera gli aminoacidi Folina-positivi ed i peptidi che corrispondono a 1 tirosina di µmol in 1 min a 37°C, il pH 7,5 facendo uso di emoglobina denaturata come substrato.
L'attività enzimatica è analizzata nella seguente miscela: Fosfato del potassio da 0,08 m. (pH 7,5), un'urea da 5 m., 4 millimetri di NaCl, 3 millimetri di CaCl2 e 16,7 mg/ml emoglobina.