Profilazione accurata dei miRNA: Un'esclusiva strategia di circolarizzazione e adattatore singolo riduce il bias di ligazione e aumenta il rilevamento dei miRNA.
Rilevamento diretto: Genera librerie di piccoli RNA senza la necessità di arricchire i piccoli RNA.
Senza gel: Rimuove i dimeri dell'adattatore da qualsiasi input senza lunghe escissioni dal gel.
DESCRIZIONE
Il kit di librerie di miRNA Zymo-Seq™ è un innovativo kit di preparazione di librerie di sequenziamento di piccoli RNA che utilizza una strategia di circolarizzazione e adattatore singolo per ridurre il bias di ligazione e fornire un profilo accurato di piccoli RNA da RNA senza cellule (cfRNA) e RNA totale. Questo flusso di lavoro semplice e snello riduce al minimo il tempo di lavoro e utilizza la rimozione senza gel dei dimeri dell'adattatore per generare librerie di piccoli RNA a filamento da plasma, biofluidi, cellule, tessuti e altro ancora.
Per preparare le librerie di miRNA Zymo-Seq™, l'RNA viene legato all'adattatore per miRNA singolo e il prodotto legato viene circolarizzato. L'adattatore in eccesso viene bloccato e rimosso con microsfere magnetiche specializzate che consentono un flusso di lavoro completamente privo di gel per input a partire da 1 ng. Il prodotto miRNA-adattatore circolarizzato viene quindi trascritto in modo inverso. Il cDNA risultante viene amplificato con primer PCR di indicizzazione che aggiungono l'adattatore compatibile con Illumina e le sequenze UDI (Unique Dual Index) per un multiplexing conveniente. Il kit include tutto il necessario per creare librerie pronte per il sequenziamento, compresi i primer di indicizzazione e le microsfere SPRI. È l'RNA-Seq reso semplice.
Specifiche tecniche
Componenti aggiuntivi necessari (non forniti) - Etanolo puro di grado biologia molecolare (> 95%)
Input massimo - 200 ng di RNA totale o RNA estratto da 200 µL di plasma o siero.
Ingresso minimo - 1 ng di RNA totale o RNA estratto da 50 µL di plasma o siero.
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