NZYTech SARS-CoV-2 One-Step RT-PCR Kit, RdRp e geni target N, IVD fornisce un set completo di reagenti e sonde per rilevare qualitativamente il genoma del SARS-CoV-2, attraverso le comuni piattaforme di PCR in tempo reale. I geni della RNA polimerasi RNA dipendente del virus (RdRp) e della fosfoproteina del nucleocapside (N) sono stati precedentemente identificati come marcatori altamente specifici per la SARS-CoV-2. Questo kit NZYTech si rivolge a regioni specifiche nei geni RdRp e N del genoma del SARS-CoV-2 per fornire la massima sensibilità di rilevamento. Utilizzando il kit NZYTech SARS-CoV-2 One-Step RT-PCR, geni target RdRp e N, IVD , l'RNA isolato e purificato con un sistema di estrazione IVD viene retrotrascritto (RT) in cDNA e successivamente amplificato mediante PCR, in un'unica reazione, utilizzando tre set di primer/sonde altamente specifici che sfruttano il cosiddetto principio TaqMan® . Durante questo processo, le sonde si annealizzano specificamente su due regioni del genoma del SARS-CoV-2, ovvero RdRp (all'interno del gene della poliproteina Orf1ab) e i geni N, nel caso in cui il campione sia stato estratto da un paziente infetto. Un ulteriore set di primer/sonde funge da controllo interno endogeno per rilevare gli acidi nucleici del gene della ribonucleasi P [RNase P] umana (RP, valutando la qualità del campione. Inoltre, questo controllo interno dimostra che non si è verificata alcuna inibizione della reazione da parte di inibitori della PCR potenzialmente presenti nei campioni clinici/ambientali. Per consentire l'identificazione dell'amplificazione dei tre target specifici in una singola reazione, le sonde specifiche per SARS-CoV-2 e RNase P umana sono etichettate in modo diverso, rispettivamente con coloranti reporter FAM™ e JOE™.
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