La trascrittasi inversa dell'oro è una nuova trascrittasi inversa ottenuta da evoluzione molecolare in vitro basata sulla trascrittasi inversa di M-MLV (RNAsi h). Il primo filo di cDNA può essere sintetizzato alla trascrittasi inversa dell'oro 37~55°C. ha ulteriore sensibilità significativamente migliore, la specificità, la stabilità termica e emivita, che è molto adatta a trascrizione inversa dei modelli del RNA con la struttura secondaria complessa. La trascrittasi inversa dell'oro ha più forte abilità di estensione e di polimerizzazione, che può essere usata per la sintesi di cDNA lungo e la costruzione della proporzione elevata della biblioteca integrale del cDNA.
Definizione dell'unità
Poli (Ra)·Oligo (distacco) è stato usato come il modello/iniettore. A 37°C per il min 10, la quantità di enzima richiesta per aggiungere 1 dTTP di nmol come sostanza insolubile in acido è stata definita come 1 unità di attività (u).
Controllo di qualità
Rilevazione del residuo di Exonuclease: Il substrato del DNA unico incagliato pmol 200 U di questo prodotto e 50 è stato incubato a 37°C per 16 h e la banda dell'elettroforesi del DNA non è cambiato dopo l'elettroforesi della PAGINA di denaturazione.
Rilevazione del residuo dell'endonucleasi: 200 U di questo prodotto e di 0,3 μg di DNA pBR322 sono stati incubati a 37°C per 4 h e le bande dell'elettroforesi dei plasmidi non sono state cambiate tramite l'elettroforesi del gel di agarosio.
Rilevazione del residuo della RNAsi: il prodotto di 200 U e 1 μg di un RNA di 293 cellule sono stati incubati a 37°C per il min 30 e la banda dell'elettroforesi di RNA era immutata tramite l'elettroforesi del gel di agarosio.