La Dongsheng M-MLV Reverse Transcriptase (RT) è una M-MLV RT geneticamente modificata.Si differenzia dall'M-MLV RT per la struttura e le proprietà catalitiche.L'enzima possiede un'attività polimerasica RNA-dipendente e DNA-dipendente e un'attività ribonucleasi H specifica dell'RNA negli ibridi RNA-DNA.La trascrittasi inversa Dongsheng M-MLV ha un'attività dell'RNasi H significativamente inferiore rispetto alla trascrittasi inversa del virus della mieloblastosi aviaria (AMV).
Fonte
Cellule di E.coli con un frammento clonato del gene pol che codifica per la trascrittasi inversa del virus della leucemia murina Moloney.
Applicazioni
Generazione di cDNA del primo filamento per l'uso in:
-PCR, vedi Protocollo per la sintesi del cDNA del primo filamento;
- PCR in tempo reale;
-sintesi del cDNA del secondo filamento;
etichettatura del DNA;
Analisi dell'RNA mediante primer extension.
Controllo di qualità
L'assenza di endodesossiribonucleasi, esodesossiribonucleasi, fosfatasi e ribonucleasi confermata da appropriati test di qualità.
Funzionalmente testato nella sintesi del cDNA del primo filamento.
Conservare il buffer
20 m M Tris-HCl (pH 7,5)
200 mm NaCl
EDTA 0,1 mm
digitale terrestre 1 mm
0,01% NP-40
50% glicerolo
Tampone di primo filamento 5x
250 mM Tris-HCl (pH 8,3 a 25°C)
375 mM KCl
15 mM MgCl2
digitale terrestre 50 mm