La cromatografia di affinità con ioni metallici immobilizzati (IMAC), sviluppata da Porath et al. (1), si basa sull'interazione di alcuni residui proteici (istidine, cisteine e, in parte, triptofani) con i cationi dei metalli di transizione. La resina chelante di rame è stata progettata specificamente per la purificazione di proteine che si associano a ioni rame (2-3), comprese le proteine con tag 6x istidina.
Resina per cromatografia di affinità con metalli immobilizzati (IMAC) che utilizza rame (Cu2+) per la purificazione di proteine marcate con istidina 6x.
Questa resina si lega a sei residui di istidina (6x His), un tag comunemente usato nella purificazione delle proteine. La resina è costituita da iminodiacetato accoppiato a microsfere di agarosio reticolate al 6%. L'iminodiacetato lega lo ione rame divalente con una capacità di 20-40μmoli di Cu2+/ml di resina. La capacità di legare le proteine è >50mg di proteine per ml di resina. Abbiamo dimostrato di legare >100mg di proteine taggate 6XHis da 50kDa in un ml di resina.
Sono disponibili anche resine chelanti immobilizzate di nichel, cobalto e zinco. Il cobalto ha la più alta selettività, seguito da zinco, nichel e rame, ma ha la più bassa capacità di carico. Il rame ha la più alta capacità di carico, seguito dal nichel e dallo zinco.
Sono disponibili specifici tamponi di legame/lavaggio ed eluizione.
Caratteristiche
Per la purificazione di proteine che si legano al rame, comprese le proteine His 6x
Alta capacità: >50mg/ml
Densità del ligando: 20-40μmoli di Cu2+ /ml di resina
Struttura della microsfera: agarosio reticolato al 6%
Applicazioni
Purificazione di affinità delle proteine che legano il rame
Purificazione di affinità di proteine con tag His 6x.
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