Mezzo reattivo Biosci™

per ricerca scientificaper coltura cellularedi citometria a flusso

La densità delle cellule mononucleate (linfociti e monociti) nel sangue periferico è compresa tra 1,075 e 1,090g/ml, diversa da quella dei globuli rossi, dei leucociti multinucleati e delle piastrine.la densità dei globuli rossi e dei granulociti è relativamente elevata (circa 1,092 g/ml) e quella delle piastrine è compresa tra 1,030 e 1,035 g/ml. Pertanto, il terreno di separazione dei linfociti umani viene utilizzato per generare un certo grado di gradiente di densità e il sangue intero diluito viene versato senza problemi sul terreno di separazione. Dopo la centrifugazione, i globuli rossi e i granulociti affondano sul fondo della provetta a causa della loro grande densità; poiché la loro densità è inferiore o uguale a quella del mezzo di separazione, i linfociti e i monociti si trovano sulla superficie del mezzo di separazione. Nel mezzo di separazione può essere presente anche una piccola quantità di cellule in sospensione. Aspirando le cellule sulla superficie del mezzo di separazione, è possibile separare le cellule mononucleate dal sangue periferico. Questa serie di prodotti presenta una serie di vantaggi, come l'uso rapido e semplice, l'assenza di citotossicità, l'elevata resa cellulare e la buona vitalità. Risoluzione dei problemi La temperatura di separazione ottimale è di (20±5)℃, oltre la quale l'effetto di separazione sarà compromesso. Preriscaldare il terreno di separazione a temperatura ambiente (20±5℃) e agitare delicatamente prima dell'uso. Evitare di utilizzare il mezzo di separazione direttamente dal frigorifero. Per il terreno di separazione, il terreno isotonico (PBS o 0,9% NaCl) utilizzato per diluire il sangue anticoagulato deve essere sterile e può essere sostituito dal terreno RPMI-1640. la diluizione del sangue 1:1 può ridurre la coagulazione degli eritrociti e aumentare la quantità di linfociti raccolti.