La digestione con pepsina in linea rapida, efficiente e riproducibile è fondamentale negli esperimenti che richiedono una maggiore copertura peptidica. Con la colonna Waters per pepsina enzimatica BEH, è possibile incorporare facilmente la digestione proteica in linea nei workflow HDX-MS esistenti.
La colonna per pepsina enzimatica BEH digerisce in modo efficiente le proteine intatte in peptidi in un sistema HDX in linea, in genere in circa 30 secondi. I peptidi peptici vengono quindi trattenuti su una colonna di preconcentrazione e focalizzati nuovamente su una colonna ACQUITY UPLC da meno di 2 μm per l’eluizione nella spettrometria di massa ad alta risoluzione.
Panoramica
Digestione delle proteine della pepsina in linea rapida, riproducibile ed efficiente, in genere entro 30 secondi
Riduzione del tempo complessivo di preparazione dei campioni di proteine
Ottimizzazione dell’efficienza della digestione delle proteine modificando la temperatura e/o la velocità di flusso
Facile collegamento al sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnologia HDX per caratterizzare la proteina del campione
Confronto dell’efficienza di digestione a bassa e ad alta pressione
Le particelle BEH sono meccanicamente resistenti e possono resistere ad alte pressioni continue e prolungate a 10 000 psi. Un confronto dell’efficienza di digestione tra digestioni a pressione di 1000 psi (bassa) e 13 500 psi (alta) mostra che la colonna Waters per pepsina enzimatica BEH offre prestazioni robuste e una migliore efficienza di digestione a pressioni più elevate.