Reagente in soluzione HOT FIREPol®

DNA polimerasiTaq polimerasiper biologia molecolare

Versione chimicamente modificata per l'avvio a caldo della Taq DNA polimerasi termostabile FIREPol®. Questo enzima si attiva solo con una pre-incubazione a 95°C, impedendo un'attività polimerasica aspecifica a temperature inferiori durante la preparazione della reazione. maggiore specificità e sensibilità ridotta formazione di primer-dimeri preparazione della reazione e spedizione senza ghiaccio HOT FIREPol® è una DNA polimerasi FIREPol® modificata chimicamente. HOT FIREPol® è inattiva a temperatura ambiente e viene attivata con un passaggio di incubazione di 15 minuti a 95°C. Ciò consente di avviare la PCR a caldo e di ridurre al minimo gli errori di innesco e di estensione dovuti a primer e primer-dimeri non specificamente annealizzati. Consigliato per applicazioni di routine (frammenti fino a 5 kb). Possiede attività di 5′→3′ polimerasi e 5′→3′ esonucleasi, nonché un'attività di transferasi terminale non dipendente dal templato, ma manca di un'attività di 3′→5′ esonucleasi (proofreading) che rende il prodotto generato adatto al TA-cloning. La fedeltà di HOT FIREPol® è simile a quella di una normale Taq DNA polimerasi (tasso di errore per nucleotide circa 2,5 x10-5). Proprietà Concentrazione: 5 U/µl Avvio a caldo: sì, attivato da una fase di incubazione di 15 minuti a 95°C Il tasso di errore per nucleotide per ciclo è di ca. 2.5 x 10-5 La precisione è di circa 4 x 104 L'emivita stimata a 95ºC è di 1,5 ore. Tampone di conservazione e diluizione: 50% glicerolo (v/v), 20 mM Tris-HCl pH Fonte: Purificato da un ceppo di E.coli che porta un plasmide iperproduttore contenente un gene modificato della DNA polimerasi di Thermus aquaticus.