Reagente in soluzione SMOChem™

enzimaper PCRper amplificazione di DNA

DUTP ultrapuro (2´Deossiuridina, 5´-Trifosfato) fornito come sale di sodio in acqua purificata (pH 8,5). Il dUTP può essere usato al posto del dTTP nei protocolli di PCR e RT-PCR per evitare il carryover da amplificazioni precedenti. La sostituzione del dUTP con il dTTP nella PCR dà origine a prodotti PCR contenenti uracile, adatti alla maggior parte delle applicazioni standard. L'enzima uracile-N-glicosilasi (UNG, indicato anche come UDG) può essere aggiunto a una premiscela per PCR per eliminare l'uracile da qualsiasi prodotto PCR contaminante, evitando così falsi positivi. Ogni lotto di dUTP viene testato per garantire l'amplificazione specifica del DNA e l'assenza di attività nucleasica. Caratteristiche Ideale per l'amplificazione PCR e la sintesi di cDNA Privo di nucleasi e ribonucleasi Applicazioni Evitare la contaminazione da carryover tra le PCR per eliminare una fonte di falsi positivi. Nota sulla preparazione Soluzione di lavoro: Si consiglia di preparare una miscela di deossinucleotidi contenente dATP, dCTP, dGTP (10 mM, ciascuno), dUTP (20 mM); (ad esempio, per la preparazione di 100 μl di miscela di nucleotidi aggiungere 10 μl di dATP, dCTP, dGTP (ciascuno) e 20 μl di dUTP a 50 μl di acqua, grado PCR).