Questo kit di analisi si basa sul test immunoenzimatico competitivo per la rilevazione del Diazepam nei mangimi, nelle urine, nel fegato e nella carne. L'antigene di accoppiamento è pre-rivestito sulle strisce di micropozzetti. Il Diazepam presente nel campione e l'antigene di accoppiamento pre-rivestito sulle strisce di micropozzetti competono per gli anticorpi anti-Diazepam. Dopo l'aggiunta del coniugato enzimatico, viene aggiunto il substrato TMB per la colorazione. Il valore della densità ottica (OD) del campione ha una correlazione negativa con il Diazepam in esso contenuto. Questo valore viene confrontato con la curva standard e si ottiene quindi la concentrazione di Diazepam.
2. Specifiche tecniche
Sensibilità: 0,1 ppb
Limite di rilevamento
Tessuto 1 ppb
Urina 1 ppb
Mangime 10 ppb
Tasso di recupero
Urina 80 ±10%
Alimenti per animali 75 ±10%
Tessuti (carne, fegato) 85 ±10%
Tasso di reazioni incrociate
Diazepam 100%
Nitrazepam 7,6%
Oxazepam 8,8%
3. Componenti
1) Strisce di micropozzetti: 12 strisce con 8 pozzetti rimovibili ciascuna
2) soluzione standard 6× (1 mL ciascuno): 0 ppb, 0,1 ppb, 0,3 ppb, 0,9 ppb, 2,7 ppb, 8,1 ppb
3) Coniugato enzimatico (12 mL) tappo rosso
4) Soluzione di lavoro anticorpo (7 mL) tappo blu
5) Soluzione di substrato A (7 mL) tappo bianco
6) Soluzione di substrato B (7 mL) tappo nero
7) Soluzione di stop (7 mL) tappo giallo
8) tampone di lavaggio concentrato 20× (40 mL) tappo bianco
9) soluzione di ridissoluzione concentrata 2× (50 mL) tappo trasparente
4. Materiali necessari ma non forniti
1) Attrezzature: lettore di micropiastre, stampante, omogeneizzatore, dispositivo di asciugatura ad azoto, votex, centrifuga, pipette di misurazione, bilancia (con sensibilità reciproca di 0,01 g).
2) Micropipettatori: monocanale da 20 a 100 µL e da 200 a 1000 µL, e multicanale da 250 µL.
3) Reagenti: N-esano, NaOH, diclorometano (CH2Cl2), CH3CN.
---