Questo kit HTRF consente la rilevazione quantitativa su base cellulare di STING fosforilato di topo come lettura dell'attivazione della via cGAS-STING.
Panoramica
Questo test cellulare HTRF quantifica in modo pratico e accurato lo STING fosforilato di topo a Ser365. In seguito all'infezione di un patogeno e al legame del dsDNA con il sensore citoplasmatico cGAS, la proteina STING viene fosforilata da TBK1. Ciò consente il suo legame con IRF3, che induce la produzione di IFN di tipo 1 e altre risposte immunitarie. La via di STING viene poi spenta dalla degradazione di STING attraverso l'autofagia.
Altre specifiche
Dimensione dell'unità 500 punti di analisi
Come funziona
Principio del saggio di fosfo-STING (Ser365) di topo
Il saggio Mouse Phospho-STING (Ser365) misura lo STING di topo quando è fosforilato a Ser365. A differenza del Western Blot, il test è interamente basato su piastra e non richiede gel, elettroforesi o trasferimento. Il saggio Mouse Phospho-STING (Ser365) utilizza 2 anticorpi marcati: uno con un fluoroforo donatore, l'altro con un accettore. Il primo anticorpo è selezionato per il suo legame specifico al motivo fosforilato della proteina, il secondo per la sua capacità di riconoscere la proteina indipendentemente dal suo stato di fosforilazione. La fosforilazione della proteina consente la formazione di un immunocomplesso che coinvolge i due anticorpi marcati. Questo porta il fluoroforo donatore in prossimità dell'accettore, generando così un segnale FRET. La sua intensità è direttamente proporzionale alla concentrazione di proteina fosforilata presente nel campione e fornisce un mezzo per valutare lo stato di fosforilazione della proteina in un formato di analisi senza lavaggio.
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