Questo kit ELISA utilizza il principio Sandwich-ELISA. La micropiastra ELISA fornita in questo kit è stata pre-rivestita con un anticorpo specifico per ICAM-1/CD54 di topo. Gli standard o i campioni vengono aggiunti ai pozzetti della piastra micro ELISA e combinati con l'anticorpo specifico. Quindi, un anticorpo di rilevazione biotinilato specifico per ICAM-1/CD54 di topo e un coniugato di Avidina-perossidasi di rafano (HRP) vengono aggiunti successivamente a ciascun pozzetto della micropiastra e incubati. I componenti liberi vengono lavati via. La soluzione di substrato viene aggiunta a ciascun pozzetto. Solo i pozzetti che contengono il topo ICAM-1/CD54, l'anticorpo di rilevazione biotinilato e il coniugato Avidina-HRP appariranno di colore blu. La reazione enzima-substrato viene terminata con l'aggiunta della soluzione di stop e il colore diventa giallo. La densità ottica (OD) viene misurata spettrofotometricamente a una lunghezza d'onda di 450 nm ± 2 nm. Il valore di OD è proporzionale alla concentrazione di Mouse ICAM-1/CD54. È possibile calcolare la concentrazione di Mouse ICAM-1/CD54 nei campioni confrontando la OD dei campioni con la curva standard.
Dati tecnici
Poiché i valori di OD della curva standard possono variare a seconda delle condizioni di esecuzione del test (ad es. operatore, tecnica di pipettaggio, tecnica di lavaggio o effetti della temperatura), l'operatore deve stabilire una curva standard per ogni test. La curva standard e i dati tipici sono forniti di seguito a titolo di riferimento.
Precisione
Precisione intra-test (precisione all'interno di un test): 3 campioni con livello basso, medio e alto sono stati analizzati rispettivamente 20 volte su una piastra.
Precisione inter-saggio (precisione tra i saggi): 3 campioni con livello basso, medio e alto
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